什么是 PicoGreen™ 定量？

PicoGreen dsDNA 定量試劑是一種高靈敏度熒光核酸染色劑，用于定量雙鏈 DNA。PicoGreen 廣泛用于分子生物學(xué)程序，例如用于亞克隆的 DNA 片段純化、用于文庫生成的 cDNA 合成以及引物測定。

PicoGreen 定量的優(yōu)點

廣泛使用的核酸濃度測量方法是測定 260nm 處的吸光度 (A260)。這被稱為吸光度方法，由于測量速度快、不需要試劑盒或試劑的直接定量以及現(xiàn)代微量儀器的寬動態(tài)范圍而被廣泛使用。 熒光方法通常用于由于單鏈核酸、蛋白質(zhì)和核苷酸的污染而需要進行特定定量的情況，這些單鏈核酸、蛋白質(zhì)和核苷酸可能會影響使用吸光度的總信號。此外，核酸制劑中經(jīng)常存在的污染物可能會造成干擾，并且無法區(qū)分 DNA 和 RNA。

Hoechst（雙苯甲亞胺）染料也是敏感的核酸染色劑。然而，該測定的選擇性稍高，無法用于 dsDNA，并且在蛋白質(zhì)存在時不會顯示出顯著的熒光增強。

PicoGreen dsDNA 定量分析可選擇性檢測低至 25 pg/ml 的 dsDNA，其中存在的 ssDNA、RNA 和游離核苷酸對熒光強度的影響極小。該檢測呈線性跨越三個數(shù)量級，并且具有少量的序列依賴性，這意味著可以從一系列來源（例如基因組 DNA、病毒 DNA、小量制備 DNA 或 PCR 擴增產(chǎn)物）精確測量 DNA。

PicoGreen dsDNA 定量非常適合基于 PCR 的測定、DNA 損傷測定、基因組 DNA 定量、微陣列樣品、測量復(fù)雜混合物中的 dsDNA 以及病毒 DNA 定量。

用于 PicoGreen 定量的 QFX 熒光計

QFX 熒光計是同類儀器中靈敏、重現(xiàn)性好的儀器。對于需要增強特異性或靈敏度的熒光測定應(yīng)用來說，它是一種強大的解決方案。該儀器能夠使用四個用戶可選的熒光通道來定量核酸和蛋白質(zhì)，從而允許使用所有主要的定量測定。QFX 熒光計提供的數(shù)據(jù)質(zhì)量以及強大的軟件和網(wǎng)絡(luò)集成，可實現(xiàn)無縫數(shù)據(jù)處理。屢獲殊榮的 DS-11 系列分光光度計/熒光計還集成了完整的熒光功能。

當(dāng) QFX 與 DeNovix 的熒光檢測結(jié)合使用時，它可以定量 0.5 pg/μL 至 4000 ng/μL 范圍內(nèi)的 DNA，是定量降解、污染或低濃度樣品的最佳解決方案。

DeNovix 熒光計的主要優(yōu)點之一是科學(xué)家可以選擇使用任何制造商的檢測方法，包括 PicoGreen dsDNA 或 QuantIT™ 檢測方法。