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      badrilla免疫測(cè)定校準(zhǔn)技術(shù)簡(jiǎn)述

      更新時(shí)間:2024-02-18      點(diǎn)擊次數(shù):583

      Badrilla 開發(fā)了一種用于免疫測(cè)定校準(zhǔn)的專有技術(shù),可將常見的免疫測(cè)定平臺(tái)(蛋白質(zhì)印跡)升級(jí)為強(qiáng)大的定量平臺(tái)。定量免疫測(cè)定可用于有限數(shù)量的應(yīng)用(某些 ELISA 測(cè)定),但大多數(shù)免疫測(cè)定形式(蛋白質(zhì)印跡、免疫顯微鏡)中不存在定量免疫測(cè)定。研究人員希望盡可能以絕對(duì)化學(xué)單位準(zhǔn)確、可重復(fù)地測(cè)量生物標(biāo)志物。為了實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo),Badrila 創(chuàng)建了一種專有的校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)技術(shù),將蛋白質(zhì)印跡升級(jí)為定量免疫測(cè)定,能夠檢測(cè)絕對(duì)化學(xué)單位(pmol/樣本或類似單位)的生物標(biāo)志物濃度。這為快速開發(fā)感興趣的生物標(biāo)志物的簡(jiǎn)單定量測(cè)定提供了一條途徑。

      這項(xiàng)技術(shù)是如何運(yùn)作的?

      高質(zhì)量校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品將特定免疫測(cè)定的表位特征整合到重組產(chǎn)品中,或者通過共價(jià)連接到支架上確定的反應(yīng)位點(diǎn)(本身是重組蛋白:b),或者通過制造為支架本身的延伸a)。這些制造方法允許根據(jù)需要摻入各種復(fù)雜的表位,從簡(jiǎn)單的肽和磷酸肽到蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域。

      可以快速生成所研究的生物標(biāo)志物校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)。此類校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)可以以允許構(gòu)建校準(zhǔn)曲線的濃度范圍并入測(cè)定中。這可用于高精度地確定生物標(biāo)志物的絕對(duì)濃度。

      在測(cè)試系統(tǒng)中,對(duì) His6 表位校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行了兩次蛋白質(zhì)印跡分析。觀察到 55kDa 的單條帶,信號(hào)強(qiáng)度隨校準(zhǔn)物上樣量的變化而變化 (4pmol – 0.125pmol)

      原始數(shù)據(jù)的密度測(cè)定允許構(gòu)建校準(zhǔn)曲線,該校準(zhǔn)曲線可以通過以高的精度一式三份檢查的三種校準(zhǔn)物濃度輕松定義。使用校準(zhǔn)曲線可以計(jì)算并行檢查的生物標(biāo)志物的濃度。觀察到的濃度和絕對(duì)濃度的變化小于 10%

      哪些生物標(biāo)志物可以校準(zhǔn)?

      · 線性肽表位

      · 翻譯后修飾位點(diǎn)(磷酸化、糖化等)

      · 半抗原(染料、藥物、代謝物)

      · 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域

      · 單個(gè)或多個(gè)表位,以及

      · 上述的組合

      通過協(xié)作發(fā)展

      Badrilla 與利茲大學(xué)、利物浦大學(xué)和牛津大學(xué)的杰出學(xué)術(shù)團(tuán)體合作開展了一項(xiàng)研發(fā)計(jì)劃。我們富有成效的協(xié)作方法使我們能夠:

      · 采用定量質(zhì)譜法的基準(zhǔn)定量蛋白質(zhì)印跡技術(shù)

      · 將定量蛋白質(zhì)印跡與高通量蛋白質(zhì)印跡相結(jié)合,以實(shí)現(xiàn)更高的分析通量

      · 探索新穎的制造技術(shù)(用于校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn))以擴(kuò)展該技術(shù)的多功能性。





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