ozbiosciences:Magnetofection™ 技術簡述

Magnetofection™ 是一種簡單且高效的方法轉染方法可轉染原代細胞和難轉染細胞。

Magnetofection™ 的原理是將核酸、轉染試劑或病毒與特定的磁性納米粒子結合起來。然后將所得的分子復合物濃縮并運輸到由適當磁場支持的細胞中。通過這種方式，利用施加在基因載體上的磁力可以將所施加的全部載體劑量非常快速地集中在細胞上，從而使 100% 的細胞與有效的載體劑量接觸，并促進細胞攝取。

它是如何工作的？

磁性納米顆粒由氧化鐵制成，可生物降解，并根據應用涂有特定的專有陽離子分子。它們與基因載體（DNA、siRNA、ODN、病毒等）的結合是通過鹽誘導的膠體聚集和靜電相互作用來實現的。然后，通過特定磁板產生的外部磁場的影響，磁性顆粒被濃縮到細胞上。遺傳物質的細胞攝取是通過胞吞作用和胞飲作用這兩個自然生物過程來完成的。因此，與破壞細胞膜、產生孔洞或電擊細胞膜的其他物理轉染方法相比，膜結構和結構保持完整。然后，根據所使用的制劑，通過不同的機制將核酸釋放到細胞質中。

1. 首先是納米顆粒上包覆的陽離子聚合物引起的質子海綿效應，促進內體滲透膨脹、內體膜破壞和細胞內 DNA 釋放。

2. 其次是顆粒上包被的陽離子脂質使內體不穩定，通過細胞負性脂質的翻轉和電荷中和將核酸釋放到細胞中。

3. 第三個是使用病毒時通常的病毒機制。

磁性納米顆粒的生物分布

可生物降解的陽離子磁性納米粒子在推薦劑量甚至更高劑量下沒有毒性。基因載體/磁性納米顆粒復合物在 10-15 分鐘后內化到細胞中，即比任何其他轉染方法快得多。 24、48 或 72 小時后，大多數顆粒位于細胞質、液泡（細胞周圍結構的膜）中，偶爾位于細胞核中。此外，磁性納米粒子不影響細胞功能。

有哪些應用？

Magnetofection™ 是適用于所有類型核酸（DNA、siRNA、dsRNA、shRNA、mRNA、ODN...）、非病毒轉染系統（轉染試劑）和病毒的通用技術。

如何使用 Magnetofection™ 試劑？

該方案是一個非常簡單的程序：
1. 在無血清培養基或緩沖液中稀釋核酸或載體，并添加 Magnetofection™ 試劑。
2. 孵育 20-30 分鐘。
3. 將這些復合物直接添加到細胞中。
4.施加磁場（將培養板放在磁力板上）。
5. 孵育5-20分鐘，取出磁板并培養細胞直至測定。

需要特定的設備嗎？

Magnetofection™ 要求是磁板專為此應用而設計。磁性板是一次性購買且可重復使用，因此您不需要與電穿孔或基因槍等方法相反的昂貴設備。基本上，所需的磁場是由特定的磁鐵產生的。三種磁性板可供選擇：超級磁性板、具有 96 個磁鐵的磁性板和巨型磁性板。他們的設計允許產生異質磁場，磁化溶液中的納米顆粒，形成非常強的梯度以吸引納米顆粒并覆蓋板的所有表面。該板可用 70% 乙醇清洗并在培養箱或機器人中使用。