Pierce™ BCA 蛋白質檢測試劑盒簡述

提供的試劑盒選項包括 Pierce 免稀釋 BSA 蛋白質標準品，這是一組七個預稀釋的 BSA 標準品，包裝在多通道移液器友好的試管中。試管條包括一個空管，使用戶能夠添加自己的樣品緩沖液以進行空白扣除。

BCA 蛋白質檢測試劑盒的特點包括：
• 比色法— 目視估計或使用標準分光光度計或酶標儀在 562 nm 處進行測量
• 準確— 顯示通過染料結合方法 (Bradford) 觀察到的蛋白質間變異的一半
• 兼容—不受大多數離子型和非離子型去污劑典型濃度的影響
• 測定時間短— 孵育30分鐘；比傳統的 Lowry 方法更簡單，速度快四倍
• 檢測范圍寬 — BSA 的線性工作范圍為 20 至 2000 µg/mL
• 靈敏— 使用增強協議檢測低至 5 µg/mL
•不再需要連續稀釋— 套件選項包括稀釋- 免費 BSA 蛋白質標準品，無需在生成標準曲線時進行連續稀釋 測定原理 BCA 蛋白質

測定
結合在堿性介質中通過蛋白質將Cu 2+還原 為 Cu 1+的特性與高靈敏度以及亞銅陽離子 (Cu 1+）由二辛可寧酸（BCA）制成。第一步是銅與蛋白質在堿性環境中螯合，形成淺藍色復合物。在這種稱為縮二脲反應的反應中，含有三個或更多氨基酸殘基的肽在含有酒石酸鈉鉀的堿性環境中與銅離子形成有色螯合物。

在顯色反應的第二步中，BCA 與第一步中形成的還原（亞銅）陽離子發生反應。兩個 BCA 分子與一個亞銅離子螯合產生深紫色反應產物。 BCA/銅復合物是水溶性的，并且隨著蛋白質濃度的增加，在 562 nm 處表現出很強的線性吸光度。該復合物的靈敏度（檢測下限）比第一個反應的淡藍色靈敏約 100 倍。

該反應受到蛋白質氨基酸序列中四個氨基酸殘基（半胱氨酸、胱氨酸、酪氨酸和色氨酸）的強烈影響。然而，與考馬斯染料結合方法（即 Bradford）不同，通用肽主鏈也有助于顏色形成，有助于最大限度地減少蛋白質成分差異引起的變異性。