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      ATCC 血管細胞基礎培養基介紹

      更新時間:2023-08-07      點擊次數:1302

      血管細胞基礎培養基是一種無菌、不含酚紅的液體組織培養基,旨在用作完整 ATCC 原代細胞解決方案系統中的一個組件。血管細胞基礎培養基旨在支持源自正常人大血管的細胞,例如人臍靜脈內皮細胞、主動脈內皮細胞或主動脈平滑肌細胞,以及微血管內皮細胞。此外,為了支持血管系統細胞的增殖和鋪板效率,血管細胞基礎培養基必須補充適當的細胞特異性生長試劑盒。

      一般的

      • 具體應用

      • 血管細胞基礎培養基是一種無菌、不含酚紅的液體組織培養基,旨在用作完整 ATCC® Primary Cell Solutions™ 系統的一個組件。

        該系統旨在支持源自正常人類大血管的細胞,例如人臍靜脈內皮細胞、主動脈內皮細胞或主動脈平滑肌細胞,以及微血管內皮細胞。血管細胞基礎培養基含有必需和非必需氨基酸、維生素、其他有機化合物、微量礦物質和無機鹽。為了支持血管系統細胞的增殖和鋪板效率,血管細胞基礎培養基必須補充適當的細胞特異性生長試劑盒。

        該系統旨在支持源自人類心血管系統的細胞,包括以下細胞類型:

        源自大血管的內皮細胞

        微血管內皮細胞

        源自大血管的平滑肌細胞

        源自心臟的肌肉細胞


        該系統旨在支持源自正常人類大血管的細胞,例如人臍靜脈內皮細胞、主動脈內皮細胞或主動脈平滑肌細胞,以及微血管內皮細胞。血管細胞基礎培養基含有必需和非必需氨基酸、維生素、其他有機化合物、微量礦物質和無機鹽。為了支持血管系統細胞的增殖和鋪板效率,血管細胞基礎培養基必須補充適當的細胞特異性生長試劑盒。

        • 原代心肌細胞;正常,人類,ATCC  PCS-120-010

        • 原代主動脈平滑肌細胞;正常,人類,ATCC  PCS-100-012

        • 原發性冠狀動脈平滑肌細胞;正常,人類,ATCC  PCS-100-021

        • 原發性肺動脈平滑肌細胞;正常,人類,ATCC  PCS-100-023

        • 原代真皮微血管內皮細胞;正常、人類、新生兒、ATCC  PCS-110-010

        • 原代臍靜脈內皮細胞;正常,人類,ATCC  PCS-100-010

        • 原代臍靜脈內皮細胞;正常,人類,混合,ATCC  PCS-100-013

        • 原代主動脈內皮細胞;正常,人類,ATCC  PCS-100-011

        • 原代冠狀動脈內皮細胞;正常,人類,ATCC  PCS-100-020

        • 原代肺動脈內皮細胞;正常,人類,ATCC  PCS-100-022

        1. 慶大霉素-兩性霉素 B 溶液 (ATCC PCS-999-025)

        2. 青霉素-鏈霉素-兩性霉素 B 溶液 ( ATCC PCS-999-002 )

        3. 酚紅 ( ATCC PCS-999-001 )

        4. 微血管內皮細胞生長試劑盒-BBE ( ATCC PCS-110-040 )

        5. 微血管內皮細胞生長試劑盒-VEGF ( ATCC PCS-110-041 )

        6. 內皮細胞生長試劑盒-BBE ( ATCC PCS-100-040 )

        7. 內皮細胞生長試劑盒-VEGF ( ATCC PCS-100-041 )

        1. 對于源自大血管的內皮細胞(例如,正常原代人臍靜脈內皮細胞 (HUVEC)、ATCC PCS-100-010、原代臍靜脈內皮細胞;正常、人、混合、ATCC PCS-100-013、原代主動脈內皮細胞Cells,ATCC PCS-100-011),用以下試劑盒之一補充血管細胞基礎培養基:

        2. 對于源自正常人體組織的微血管內皮細胞(例如,原代真皮微血管內皮細胞;正常、人類、新生兒、ATCC PCS-110-010),用以下試劑盒之一補充血管細胞基礎培養基:

        3. 對于源自大血管的平滑肌細胞(例如,原代主動脈平滑肌細胞,ATCC PCS-100-012),用血管平滑肌細胞生長試劑盒(ATCC PCS-100-042)補充血管細胞基礎培養基。

        4. 可選媒體補充:

      處理信息

      • 處理程序

      • 完整生長培養基的制備

        表 1.如果使用內皮細胞生長試劑盒-BBE (ATCC ® PCS-100-040),請添加每種成分的一定體積: 

        成分

        體積

        最終濃度

        牛腦提取物 (BBE)

        1.0毫升

        0.2%

        重組人EGF

        0.5毫升

        5納克/毫升

        L-谷氨酰胺

        25.0毫升

        10毫米

        硫酸肝素

        0.5毫升

        0.75 單位/毫升

        氫化可de松半琥珀酸酯

        0.5毫升

        1微克/毫升

        胎牛血清

        10.0毫升

        2%

        抗壞血酸         0.5毫升   50微克/毫升

         

                表 2 . 如果使用內皮細胞生長試劑盒-VEGF (ATCC ® PCS-100-041),請添加每個成分的一定體積:

        成分

        體積

        最終濃度

        重組人VEGF

        0.5毫升

        5納克/毫升

        重組人EGF

        0.5毫升

        5納克/毫升

        rh FGF 堿性

        0.5毫升

        5納克/毫升

        重組人IGF-1

        0.5毫升

        15納克/毫升

        L-谷氨酰胺

        25.0毫升

        10毫米

        硫酸肝素

        0.5毫升

        0.75 單位/毫升

        氫化可de松半琥珀酸酯

        0.5毫升

        1微克/毫升

        胎牛血清

        10.0毫升

        2%

        抗壞血酸

        0.5毫升

        50微克/毫升

         

               
        表 3
         . 如果使用血管平滑肌生長試劑盒 (ATCC ® PCS-100-042),請添加每個組件的一定體積:

        成分

        體積

        最終濃度

        rh FGF-堿性

        0.5毫升

        5納克/毫升

        重組人胰島素

        0.5毫升

        5微克/毫升

        抗壞血酸

        0.5毫升

        50微克/毫升

        L-谷氨酰胺

        25.0毫升

        10毫米

        重組人EGF

        0.5毫升

        5納克/毫升

        胎牛血清

        25.0毫升

        5%

         

        表 4.如果使用微血管內皮細胞生長試劑盒-BBE (ATCC ® PCS-110-040),請添加每種成分的一定體積: 

        成分

        體積

        最終濃度

        牛腦提取物 (BBE)

        1.0毫升

        0.2%

        重組人EGF

        0.5毫升

        5納克/毫升

        L-谷氨酰胺

        25.0毫升

        10毫米

        硫酸肝素

        0.5毫升

        0.75 單位/毫升

        氫化可de松半琥珀酸酯

        0.5毫升

        1微克/毫升

        胎牛血清

        25.0毫升

        5%

        抗壞血酸

        0.5毫升

        50微克/毫升

         

               表 5 . 如果使用微血管內皮細胞生長試劑盒-VEGF (ATCC ® PCS-110-041),請添加每種成分的一定體積:

        成分

        體積

        最終濃度

        重組人VEGF

        0.5毫升

        5納克/毫升

        重組人EGF

        0.5毫升

        5納克/毫升

        rh FGF 堿性

        0.5毫升

        5納克/毫升

        重組人IGF-1

        0.5毫升

        15納克/毫升

        L-谷氨酰胺

        25.0毫升

        10毫米

        硫酸肝素

        0.5毫升

        0.75 單位/毫升

        氫化可de松半琥珀酸酯

        0.5毫升

        1微克/毫升

        胎牛血清

        25.0毫升

        5%

        抗壞血酸

        0.5毫升

        50微克/毫升

         

        表 6.如果使用心肌細胞生長試劑盒 (ATCC ® PCS-120-040),請添加每種成分的一定體積:

        成分

        體積

        最終濃度

        L-谷氨酰胺

        25.0毫升

        10毫米

        胎牛血清

        25.0毫升

        5%

        胎球蛋白

        5.0毫升

        25毫克/毫升

        重組人FGF-b

        0.5毫升

        5納克/毫升

        重組人胰島素

        0.5毫升

        5毫克/毫升

        抗壞血酸

        0.5毫升

        50微克/毫升

        重組人EGF/TGF-b1

        0.5毫升

        5 納克/毫升,30 皮克/毫升

         

        增殖不需要抗菌劑和酚紅,但如果需要可以添加。表 7 總結了添加到完整生長培養基中的每種可選組分的建議體積。

        1. 從冰箱中取出一套生長套件;確保所有組件的蓋子均已擰緊。

        2. 在將生長套件的組件添加到基礎培養基中之前將其解凍。在添加到基礎培養基之前,需要在 37°C 水浴中加熱 L-谷氨酰胺組分并搖動以溶解任何沉淀物。

        3. 從冷藏處獲取一瓶血管細胞基礎培養基 (475 mL)。

        4. 用 70% 乙醇噴灑所有生長套件組件小瓶和基礎培養基瓶的外表面,以凈化它們。

        5. 使用無菌技術并在層流罩或生物安全柜中工作,使用單獨的無菌移液器將表 1、2、3、4 或 5 中所示的每個生長套件組件的體積轉移到基礎培養基瓶中轉移。

      表 7.添加抗菌劑/抗真菌劑和酚紅(可選)

      成分

      體積

      最終濃度

      慶大霉素-兩性霉素B溶液

      0.5毫升

      慶大霉素:10 µg/mL

      兩性霉素 B:0.25 µg/mL

      青霉素-鏈霉素-兩性霉素B溶液

      0.5毫升

      青霉素:10 單位/mL

      鏈霉素:10 µg/mL

      兩性霉素 B:25 ng/mL

      酚紅

      0.5毫升

      33微米

      1. 蓋緊生長培養基的瓶子并輕輕旋轉內容物以確保溶液均勻。請勿用力搖晃,以免產生泡沫。給瓶子貼上標簽并注明日期。

      2. 完整的生長培養基應在 2°C 至 8°C 的黑暗條件下保存(不要冷凍)。在這些條件下儲存時,完整培養基可穩定保存 30 天。 

      冷凍保存

      1. 檢查所有容器是否有泄漏或破損。
      2. 將基礎培養基保存在 2°C 至 8°C 下。不要凍結。避光。使用前加熱介質時,溫度不要超過 37°C。當在 2°C 至 8°C 的黑暗中儲存時,產品在標簽上的有效期內保持穩定。


      細菌和真菌測試:沒有檢測到

      支原體污染:沒有檢測到

      內毒素:< 0.5 EU/毫升

      滲透壓:270±10毫滲透壓/千克

      酸堿度:7.8±0.3

      功能測試:增殖率和形態

      本產品僅供實驗室研究使用。它不適用于任何動物或人類治療用途、任何人類或動物消費或任何診斷用途。


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